T/CAICC 02-2021
Detección rápida de acetamiprid en leche cruda: inmunocromatografía con oro coloidal (Versión en inglés)

Estándar No.

T/CAICC 02-2021

Idiomas

Chino, Disponible en inglés

Fecha de publicación

2022

Organización

Group Standards of the People's Republic of China

Ultima versión

T/CAICC 02-2021

Alcance

Principio Este método adopta el principio de inmunocromatografía de inhibición competitiva. El acetamiprid de la muestra se extrae y se une al anticuerpo específico marcado con oro coloidal, inhibiendo la unión del anticuerpo al antígeno en la línea de prueba (línea T) de la tira reactiva, lo que produce un cambio en el color de la prueba. línea. Comparando la profundidad del color de la línea de prueba y la línea de control de calidad (línea C), se puede determinar cualitativamente el acetamiprid en la muestra. 4 Reactivos y materiales 4.1 Reactivos A menos que se indique lo contrario, todos los reactivos son de calidad analítica y el agua de laboratorio debe cumplir con los requisitos para agua secundaria en GB/T6682. 4.1.1 Metanol (CH3OH). 4.1.2 Material de referencia: El nombre chino, el nombre en inglés, el número de registro CAS, la fórmula molecular y la masa molecular relativa del material de referencia de acetamiprid se muestran en la Tabla 1. La pureza es ≥98%. Tabla 1 Nombre chino, nombre inglés, número de registro CAS, fórmula molecular, masa molecular relativa de la sustancia de referencia acetamiprid Nombre chino Nombre inglés Número de registro CAS Fórmula molecular Masa molecular relativa Acetamiprid 160430-64-8 C10H11ClN4 222,68 Nota: o equivalente Sustancias trazables. 4.2 Preparación de la solución 4.2.1 Solución madre estándar de acetamiprid (100 μg/mL): Pesar con precisión 1 mg de material de referencia de acetamiprid (4.1.2), colocarlo en un matraz volumétrico de 10 ml y agregarlo con metanol (4.1.1). Disolver y diluir. hasta la marca, agitar bien y preparar una solución madre estándar de acetamiprid con una concentración de 100 μg/ml. Conservar protegido de la luz a 4 ℃, válido por 6 meses. 4.2.2 Solución de trabajo estándar de acetamiprid (1 μg/mL): Pipetear con precisión 0,1 ml de solución madre estándar de acetamiprid (100 μg/mL) (4.2.1) y colocarla en un matraz volumétrico de 10 ml, diluir hasta la marca con metanol (4.1. 1), agite bien y prepare una solución de trabajo estándar de acetamiprid con una concentración de 1 μg/ml. Nuevo para uso inmediato. 4.3 Materiales Tiras reactivas para inmunocromatografía de oro coloidal con acetamiprid, la matriz aplicable es leche cruda. Debe almacenarse en un lugar fresco, seco y oscuro. 4.3.1 Micropocillos marcados con oro (que contienen anticuerpos específicos marcados con oro coloidal). 4.3.2 Tiras reactivas. 5 Instrumentos y equipos 5.1 Balanza electrónica: La sensibilidad es de 0,01 g. 5.2 Pipeta: 10 μL ~ 200 μL, 100 μL ~ 1000 μL. 5.3 Mini baño metálico. 6 Pasos del análisis 6.1 Preparación de la muestra Tome una cantidad adecuada de muestra representativa y mezcle bien. 6.2 Extracción de muestras Las muestras basadas en leche cruda se pueden cargar directamente para analizarlas o analizarlas después de la dilución de acuerdo con las instrucciones del producto. 6.3 Pasos de medición: Pipetee 200 μl de la solución de muestra que se va a analizar en el microporo marcado con oro (4.3.1), bombee de 5 a 10 veces para mezclar uniformemente, incube a 35 °C durante 5 minutos y retire la tira reactiva (4.3.2). Inserte el extremo de la muestra verticalmente hacia abajo en el micropocillo con etiqueta dorada, incube a 35°C durante 5 minutos, saque la tira reactiva y juzgue el resultado. Nota 1: Se recomienda seguir las instrucciones de la tira reactiva para los pasos de medición. Nota 2: Se recomienda utilizar un medidor de lectura para determinar el resultado. Para el uso específico del medidor de lectura, consulte el manual de instrucciones del instrumento. 6.4 Prueba de control de calidad Cada lote de muestras debe someterse a una prueba en blanco y a una prueba de control de calidad enriquecida al mismo tiempo. 6.4.1 Prueba en blanco: Pese la muestra en blanco y siga los pasos 6.2 y 6.3 de la misma manera que la muestra. 6.4.2 Para la prueba de control de calidad enriquecida, transfiera con precisión 10 ml de la muestra en blanco a un tubo de centrífuga, agregue 0,1 ml de solución de trabajo estándar de acetamiprid (1 μg/ml) (4.2.2) y mezcle la muestra con la concentración de acetamiprid es 10 μg / L. Siga los pasos 6.2 y 6.3 de la misma manera que la muestra. 7 Juicio de resultados 7.1 La medición del medidor de lectura debe operarse de acuerdo con las instrucciones del medidor de lectura, leer directamente y juzgar el resultado. 7.2 Juicio visual El resultado se juzga comparando la profundidad del color de la línea de control de calidad (línea C) y la línea de prueba (línea T). El diagrama esquemático del juicio visual se muestra en la Figura 1. 7.2.1 Si la línea de control de calidad no válida (línea C) no desarrolla color, independientemente de si la línea de prueba (línea T) desarrolla color, indica un funcionamiento incorrecto o la tira reactiva ha caducado y el resultado de la prueba no es válido. 7.2.2 Para resultados positivos, la línea de control de calidad (línea C) desarrolla color pero la línea de prueba (línea T) no desarrolla color o tiene un color más claro que la línea de control de calidad (línea C), lo que indica que el contenido de acetamiprid en la muestra es superior al límite de detección del método y se consideró positiva. 7.2.3 Si la línea de control de calidad (línea C) del resultado negativo está coloreada y la línea de prueba (línea T) es más oscura que la línea de control de calidad (línea C) o es básicamente del mismo color que la línea de control de calidad ( Línea C), indica que acetamiprid está presente en la muestra. Si el contenido es inferior al límite de detección del método, se considera negativo. Figura 1 Diagrama esquemático del juicio visual 7.3 Requisitos de la prueba de control de calidad El resultado de la medición de la prueba en blanco debe ser negativo y el resultado de la medición de la prueba de control de calidad enriquecida debe ser positivo. 8 Confirmación del resultado Cuando el resultado de la prueba es positivo, debe confirmarse de acuerdo con los estándares del método especificados en GB 2763. 9 Indicadores de desempeño 9.1 Límite de detección: 10μg/L. 9.2 Sensibilidad: ≥95%. 9.3 Especificidad: ≥90%. 9.4 Tasa de falsos negativos: ≤5%. 9.5 Tasa de falsos positivos: ≤10%. Nota: Consulte el Apéndice A para conocer el método de cálculo de los indicadores de desempeño. 10 Los demás reactivos, la información de las tiras reactivas y los pasos operativos descritos en este método son para comodidad de los usuarios del método y no están limitados al utilizar este método. Los usuarios del método deben utilizar reactivos y tiras reactivas probados que cumplan con los indicadores de rendimiento especificados en este método.

T/CAICC 02-2021 Historia

• 2022 T/CAICC 02-2021 Detección rápida de acetamiprid en leche cruda: inmunocromatografía con oro coloidal