T/GZCX 018-2022
Determinación del contenido de flavonoides totales en Rosa roxburghii y sus productos. (Versión en inglés)

Estándar No.
T/GZCX 018-2022
Idiomas
Chino, Disponible en inglés
Fecha de publicación
2022
Organización
Group Standards of the People's Republic of China
Ultima versión
T/GZCX 018-2022
Alcance
Principio del método Los flavonoides son un término general para una clase de compuestos naturales con una estructura de anillo de benzopirano. Los flavonoides disueltos en etanol reaccionan con sales de aluminio en condiciones débilmente alcalinas para formar sustancias coloreadas, que pueden producir una absorción máxima cerca de una longitud de onda de 420 nm. Dentro de un cierto rango de concentración, su absorbancia es proporcional al contenido de flavonoides. En comparación con el estándar de rutina, el contenido de flavonoides se puede determinar cuantitativamente. 5 Reactivos y materiales 5.1 A menos que se especifique lo contrario, solo se deben utilizar reactivos analíticamente puros y agua de primer grado especificados en GB/T6682. 5.1.1 Producto estándar de rutina (C27H30O16, número CAS: 153-18-4), pureza ≥98,0%. 5.1.2 Etanol anhidro (C2H6O). 5.1.3 Nitrato de aluminio [Al.(NO3)3·9H2O]. 5.1.4 Acetato de potasio (C2H3KO2). 5.2 Preparación del reactivo 5.2.1 Solución de referencia de rutina (1 mg/mL): Pesar con precisión 50 mg (con una precisión de 0,1 mg) de estándar de rutina, agregar una pequeña cantidad de etanol absoluto Disolver, transferir a un matraz volumétrico de 50 ml, agregar etanol absoluto para llevar el volumen hasta la marca y agite bien. 5.2.2 Solución de nitrato de aluminio (100 g/L): Pesar Al(NO3)3·9(H2O) 17,60 g (con una precisión de 0,01 g), añadir una pequeña cantidad de agua para disolver, transferir a un matraz aforado de 100 ml, agregar agua para alcanzar el volumen hasta la marca y agitar bien. 5.2.3 Solución de acetato de potasio (98 g/L): Pese 9,80 g de C2H3KO2 (con una precisión de 0,01 g), agregue una pequeña cantidad de agua para disolver y transfiera a un matraz volumétrico de 100 ml. Agregue agua para llevar a volumen y agite bien. 6 Instrumentos y equipos 6.1 Espectrofotómetro UV. 6.2 Máquina rompemuros de alta velocidad. 6,3 Balanza analítica, la sensibilidad es de 0,0001 g. 6.4 Extractor ultrasónico. 6,5 Centrifugadora, 4000 r/min. 6.6 Triturador de tejidos. 7 Paso de análisis 7.1 Preparación de la muestra: Pele y quite las semillas de la pera fresca (3.1), bata con un machacador de pañuelos, mezcle uniformemente y reserve; retire la pera seca (3.2) y se pueden eliminar las impurezas. como se ve en la fruta en conserva de tuna (3.3). Utilice un rompe paredes de alta velocidad para triturarla hasta convertirla en polvo y reservar. Muela el polvo liofilizado de tuna (3.4) y el polvo de pera secada por aspersión (3.5). uniformemente para su uso posterior. 7.2 Extracción de la muestra 7.2.1 Muestra sólida: Tome 0,5~2 g de la muestra 7.1, pésela con precisión (con una precisión de 0,0001 g) y coloque un tapón de secado de peso constante. En el matraz Erlenmeyer, agregue 50 ml de etanol absoluto, péselo y colóquelo. en un extractor ultrasónico para tratamiento ultrasónico durante 1 hora (agitar la solución cada 20 minutos), dejar enfriar, pesar nuevamente y completar con etanol absoluto, restar el peso perdido, agitar bien, filtrar, centrifugar el filtrado. durante 10 minutos y tomar el sobrenadante. 7.2.2 Muestra líquida: Para muestras líquidas como jugo de rododendro (3.6) y jugo concentrado de rododendro (3.7), mida con precisión de 1 a 10 ml de la muestra y colóquela en un matraz cónico seco con un peso y tapón constantes. ., agregar 50 mL de etanol absoluto, pesarlo, colocarlo en un extractor ultrasónico para tratamiento ultrasónico durante 1 hora (agitar la solución cada 20 minutos), dejar enfriar, pesarlo nuevamente y usar etanol absoluto para compensar el perdió peso., agitar bien, filtrar, continuar centrifugando el filtrado durante 10 minutos y tomar el sobrenadante. 7.3 Curva de trabajo estándar Mida con precisión 0,0 ml, 1,0 ml, 2,0 ml, 3,0 ml, 4,0 ml, 5,0 ml de solución de referencia de rutina (5.2.1) Colóquelos en matraces aforados de 50 mL, agregar en secuencia 1 mL de solución de nitrato de aluminio (5.2.2) y 1 mL de solución de acetato de potasio (5.2.3), agitar bien y agregar agua hasta la marca. Después de dejarlo reposar durante 1 hora, medir la absorbancia a 420 nm. Usando la masa de rutina (mg) en 50 ml de solución como abscisa y la absorbancia como ordenada, dibuje una curva estándar. 7.4 La prueba en blanco se realiza en paralelo con la medición de la muestra. Tome la misma cantidad de todos los reactivos y utilice los mismos pasos de análisis, pero no agregue la muestra. 7.5 Determinación de la muestra Mida con precisión 1,0 mL de la solución de extracción (7.2) y colóquelo en un matraz aforado de 50 mL, agregue 1 mL de solución de nitrato de aluminio (5.2.2) y solución de acetato de potasio (5.2.3) 1 mL, agite bien y añadir agua hasta la marca. Después de dejarlo reposar durante 1 hora, medir la absorbancia a 420 nm. Si el contenido total de flavonoides de la muestra es alto (la absorbancia no está entre 0,1 y 0,8), se puede diluir adecuadamente antes del análisis y la medición. 8 Explicación de los resultados del análisis 8.1 El contenido total de flavonoides (calculado como rutina) en muestras sólidas como peras frescas y peras secas se expresa como porcentaje (%), según la fórmula ( 1 ) Hacer cálculos. x=……………………(1) Donde: x───Contenido total de flavonoides en la muestra (calculado como rutina); La masa de rutina en la muestra detectada por la curva, la unidad es miligramos (mg); M───La masa de la muestra, la unidad es gramos (g); Mantenga dos decimales. 8.2El contenido total de flavonoides (medido como rutina) en muestras líquidas como jugo original de pera y jugo de pera concentrado se expresa como porcentaje (%) y se calcula según la fórmula (2): x== ;……………………(2) donde: x───contenido total de flavonoides en la muestra (calculado como rutina); La masa de rutina en la muestra, en miligramos (mg); v───Volumen de muestra, en mililitros (mL); d───Factor de dilución de muestra; Dos personas. 9Precisión: En condiciones repetidas, la diferencia absoluta entre dos resultados de medición independientes obtenidos no supera el 10% de la media aritmética.

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