Esta norma describe un método de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem para la determinación del contenido de melatonina en suero y es adecuado para la determinación de melatonina en suero. Método de extracción: transfiera con precisión 1 ml de muestra a un tubo de centrífuga de 15 ml, agregue 50 µl de solución de trabajo estándar de melatonina deuterada, agregue 4 ml de metanol y use un mezclador vórtex para oscilar y extraer durante 5 minutos. Utilice una centrífuga de alta velocidad y baja temperatura para centrifugar a 10.000 gy 4°C durante 5 minutos. Tome el sobrenadante y páselo a través de una membrana de filtro de 0,22 μm para medir la cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem. Puntos técnicos 1: Como disolvente de melatonina, el metanol no afectará la estabilidad de la sustancia objetivo en la muestra, pero también puede desnaturalizar y precipitar la proteína en el suero. La operación experimental es simple y su tasa de recuperación puede alcanzar más de 60. %, que puede satisfacer bien las necesidades de detección de melatonina sérica. Punto técnico 2: La melatonina en suero se extrae con metanol, se mide con cromatografía líquida-espectrómetro de masas en tándem y se cuantifica mediante el método del estándar interno. Este estándar estipula que el límite de detección de melatonina es 0,01 μg/L y el límite de cuantificación es 0,05 μg/L; la tasa de recuperación de melatonina de este método estándar es: 60~120%, lo que cumple con GB/T?27404. rango de tasa a un cierto nivel de concentración; desviación relativa (RSD) ≤ 20%.
T/BDAS 002-2023 Historia
2023T/BDAS 002-2023 Determinación del contenido de melatonina en suero: cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem