ASTM E1853M-04
Guía estándar para medir la presencia de compuestos orgánicos planos que inducen CYP1A, utilizando sistemas de prueba de genes informadores

Estándar No.

ASTM E1853M-04

Fecha de publicación

2004

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Estado

 2012-12

Ultima versión

ASTM E1853M-04

Alcance

menudo se ha demostrado que los compuestos que se unen al receptor Ah e inducen CYP1A son más tóxicos o cancerígenos, o ambos, que otros compuestos orgánicos. Se ha demostrado que las dioxinas, furanos y PCB se bioconcentran en organismos expuestos y se biomagnifican en la red alimentaria (ver Guía E 1023). Las pruebas con especies de aves, mamíferos y peces han demostrado que la exposición a estos compuestos puede producir efectos fisiológicos, reproductivos e histopatológicos (12, 13). La preocupación por la posible contaminación del agua, los alimentos, la vida silvestre, el suelo y los sedimentos acuáticos a partir de estos compuestos ha llevado a la necesidad de realizar análisis químicos analíticos de una gran cantidad de muestras ambientales. El uso de una herramienta de detección como este Sistema de gen informador humano (HRGS) permitirá la identificación de muestras significativamente contaminadas. Estos métodos ayudarán a separar de manera rentable las muestras de alta prioridad de aquellas que no requieren una caracterización química costosa adicional.1.1 Esta guía cubre las pautas recomendadas para realizar una prueba de presencia de compuestos orgánicos que se unen al receptor Ah e inducen la Locus CYP1A en el cromosoma de los vertebrados. En condiciones de prueba apropiadas, la inducción de CYP1A es evidencia de que las células han estado expuestas a uno o más de estos compuestos orgánicos xenobióticos que incluyen dioxinas, furanos, PCB coplanares y varios hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAH). La detección de la inducción se ha hecho simple y rápida gracias a la integración estable del plásmido de luciérnaga, de modo que la unión del receptor Ah da como resultado la producción de luciferasa. La producción de luciferasa es función tanto de la potencia del compuesto como de la concentración. Este tipo de sistema de gen informador humano (HRGS) ha mostrado relaciones concentración-respuesta utilizando 2,3,7,8-TCDD, 5 PCB coplanares y varios hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAH) (1-3). Esta guía describe las condiciones de prueba bajo las cuales se pueden analizar extractos solventes de muestras ambientales (agua, tejido, suelo o sedimentos) para detectar la presencia de compuestos orgánicos inductores de CYP1A.1.2 Los procedimientos de prueba presentados en esta guía se publicaron anteriormente (4, 5 ) y establecido como Método 4425 de la EPA (6). Estas referencias deben consultarse para obtener detalles sobre la construcción y el mantenimiento de la línea celular y la respuesta de las células a diversas sustancias orgánicas. 1.3 Se deben seguir todos los procedimientos de seguridad y salud del laboratorio. Esto incluye el uso de gafas, guantes y otra ropa protectora al manipular los reactivos. La información sobre toxicidad, procedimientos de manipulación y procedimientos de residuos debe revisarse antes de usar todos los productos químicos. 1.4 Esta norma no pretende abordar todas las preocupaciones de seguridad, si las hay, asociadas con su uso. Es responsabilidad del usuario de esta norma establecer prácticas apropiadas de seguridad y salud y determinar la aplicabilidad de las limitaciones reglamentarias antes de su uso.

ASTM E1853M-04 Documento de referencia

• ASTM D3976 Práctica estándar para la preparación de muestras de sedimentos para análisis químico
• ASTM E1023 Guía estándar para evaluar el peligro de un material para los organismos acuáticos y sus usos
• ASTM E1391 Guía estándar para la recolección, almacenamiento, caracterización y manipulación de sedimentos para pruebas toxicológicas

ASTM E1853M-04 Historia

• 2004 ASTM E1853M-04 Guía estándar para medir la presencia de compuestos orgánicos planos que inducen CYP1A, utilizando sistemas de prueba de genes informadores
• 1998 ASTM E1853M-98 Guía para medir la presencia de compuestos orgánicos planos que inducen CYP1A, utilizando sistemas de prueba de genes informadores
• 1970 ASTM E1853-96