ASTM F2739-08
Guía estándar para cuantificar la viabilidad celular dentro de estructuras de biomateriales

Estándar No.

ASTM F2739-08

Fecha de publicación

2008

Organización

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Estado

Remplazado por

ASTM F2739-16

Ultima versión

ASTM F2739-19

Alcance

El número y la distribución de células viables y no viables dentro o en la superficie de un andamio de biomaterial es una de varias características importantes que pueden determinar el rendimiento del producto in vivo de construcciones de células/biomateriales (ver 5.7); por lo tanto, existe la necesidad de métodos de prueba estandarizados para cuantificar la viabilidad celular. Existe una variedad de métodos estáticos y dinámicos para sembrar células en andamios, cada uno con diferentes eficiencias de siembra de células. En general, se ha demostrado que los métodos estáticos, como el pipeteo directo de células sobre las superficies del andamio, tienen menores eficiencias de siembra de células que los métodos dinámicos que empujan las células hacia el interior del andamio. Los métodos dinámicos incluyen: inyección de células en el andamio, siembra de células en biomateriales contenidos en matraces giratorios o cámaras de perfusión, o siembra mejorada mediante la aplicación de fuerzas centrífugas. Los métodos descritos en esta guía pueden ayudar a establecer eficiencias de siembra de células en función del método de siembra y a estandarizar el número de células viables dentro de una metodología determinada. Como se describe en la Guía F 2315, los andamios gruesos o los andamios muy cargados de células provocan limitaciones de difusión durante el cultivo o la implantación que pueden provocar la muerte celular en el centro de la construcción, dejando solo un borde exterior de células viables. Las variaciones espaciales de células viables como esta se pueden cuantificar utilizando las pruebas de esta guía. La eficacia del método de cultivo o las condiciones del biorreactor sobre la viabilidad de las células en todo el andamio también se puede evaluar con los métodos descritos en esta guía. Estos métodos de prueba se pueden utilizar para cuantificar células en biomateriales tridimensionales duros o blandos, como cerámicas y geles poliméricos. Los métodos de prueba también se aplican a células sembradas sobre recubrimientos porosos. Los métodos de prueba descritos en esta guía también se pueden utilizar para distinguir entre células viables en proliferación y no en proliferación. Las células en proliferación pasan por la fase de síntesis de ADN (S) y la fase de mitosis (M) para producir dos células hijas. Las células viables que no proliferan se encuentran en alguna fase del ciclo celular, pero no necesariamente avanzan a través del ciclo celular que culmina en la proliferación. Las células viables pueden estar bajo estrés o sufriendo apoptosis. En esta guía no se abordan los ensayos para evaluar el estrés celular o la apoptosis. Si bien la viabilidad celular es una característica importante de un TEMP, el rendimiento biológico de un TEMP depende de parámetros adicionales. Se recomiendan pruebas adicionales para evaluar y confirmar la identidad celular, la expresión de proteínas, el perfil genético, la progresión del linaje, el grado de diferenciación, el estado de activación y la morfología. Las pruebas de biocompatibilidad fundamentales del material de soporte en sí, como se describe en la Práctica F 748, deben completarse antes de usar el biomaterial con células.1.1 Esta guía es un recurso de métodos de prueba de viabilidad celular que se pueden utilizar para evaluar el número y la distribución de células viables y no. -células viables dentro de armazones de biomateriales porosos y no porosos, duros o blandos, como los utilizados en productos médicos de ingeniería tisular (TEMP). 1.2 Además de proporcionar un compendio de técnicas disponibles, esta guía describe las interacciones específicas de los materiales con los ensayos celulares que pueden interferir con el análisis preciso de la viabilidad celular e incluye orientación sobre cómo evitar y/o tener en cuenta el ensayo de viabilidad celular/material de soporte. interacciones. 1.3 Estos métodos se pueden utilizar para estructuras tridimensionales que contienen células que se han cultivado in vitro o para construcciones de estructuras/células que se recuperan después de su implantación en organismos vivos. 1.4 Esta guía no propone criterios de aceptación basados en la aplicación de métodos de prueba de viabilidad celular. 1.5 Los valores indicados en unidades SI deben ser......

ASTM F2739-08 Documento de referencia

• ASTM F2149 Método de prueba estándar para análisis automatizados de células: método de zona de detección eléctrica para enumerar y dimensionar suspensiones de células individuales*， 2023-11-09 Actualizar
• ASTM F2315 Guía estándar para la inmovilización o encapsulación de células o tejidos vivos en geles de alginato
• ASTM F748 Práctica estándar para seleccionar métodos de prueba biológicos genéricos para materiales y dispositivos

ASTM F2739-08 Historia

• 2019 ASTM F2739-19 Guía estándar para cuantificar la viabilidad celular y atributos relacionados dentro de estructuras de biomateriales
• 2016 ASTM F2739-16 Guía estándar para cuantificar la viabilidad celular dentro de andamios de biomateriales
• 2008 ASTM F2739-08 Guía estándar para cuantificar la viabilidad celular dentro de estructuras de biomateriales